以PCR產(chǎn)物為模板，只要引物，體系對(duì)，怎么P怎么出你的模板就是PCR產(chǎn)物，濃度再低也沒(méi)事，稀釋100倍沒(méi)問(wèn)題沒(méi)什么要注意的；RNA分子怎么能作為PCR模板呢PCR的酶是DNA聚合酶，需要用DNA為模板因此需要mRNA逆轉(zhuǎn)錄為cDNA，再以cDNA為模板才能進(jìn)行PCR反應(yīng)。

RNA做模板就是所謂的反向PCR了耐高溫不是聚合酶的通性，聚合酶一般都不耐高溫，所以雖然PCR的思想早就有了，但是因?yàn)闆](méi)有耐高溫的聚合酶所以才無(wú)法付諸實(shí)踐，直到后來(lái)從水生棲熱菌中發(fā)現(xiàn)了Taq才使得PCR被廣泛使用；1引物和模板在加之前離不離心 跟以后有沒(méi)有條帶沒(méi)有關(guān)系PCR沒(méi)有條帶一般是因?yàn)楦魑镔|(zhì)之間的比例或者退火溫度不合適，你需要調(diào)整和優(yōu)化每換一種試劑都要重新優(yōu)化PCR條件2把水bufferDntpmg離子做一個(gè)mixture。

你看得那個(gè)糊涂蛋的protocol，其實(shí)做實(shí)驗(yàn)沒(méi)有那么刻意，能做出結(jié)果就是最好的了當(dāng)然也得注意細(xì)節(jié)；PCR分開(kāi)擴(kuò)增，2者或多者片段大于20bp可以混在一起 3730毛細(xì)管電泳可以區(qū)分出來(lái)。

首先，如果你的引物不存在相互的干擾，那么你可以試著放在一個(gè)體系里面做實(shí)驗(yàn)其次，引物設(shè)計(jì)按照標(biāo)準(zhǔn)的方法就可以 最后，實(shí)在是要用電泳的方法，并且你的片段大小相差較大的情況下可以使用瓊脂糖，什么情況下用聚丙烯酰胺凝膠；在PCR反應(yīng)中，除了引物和模板，其他的試劑是完全一樣的，為了防止在加樣的過(guò)程中，造成其他試劑的污染，一定是把別的都取出來(lái)以后，再加引物，再加模板這樣其他人，或者其他樣品再用這些試劑的時(shí)候，相互污染的可能性小。

pcr技術(shù)的模板和原料是什么

1、PCR合成的時(shí)候當(dāng)然不只是需要引物，模板鏈也就是目的基因片段是必須的因?yàn)镈NA聚合酶合成DNA時(shí)只能從一段已有的DNA片段往上加脫氧核苷酸延伸子鏈，而不能從頭合成，所以需要一段引物引物就是目的基因在5#39段的一小段序列。

2、菌落pcr和菌液pcr在原理和操作方面有什么區(qū)別 如果轉(zhuǎn)化成功的話，菌落里的菌就含有你克隆的質(zhì)粒載體了，用槍頭直接碰一下，然后作為PCR模板，就可以進(jìn)行PCR擴(kuò)增了但是菌落PCR鑒定的假陽(yáng)性率其實(shí)也不低，所以建議你挑取菌落。

3、原理是提取組織或細(xì)胞中的總RNA，以其中的mRNA作為模板，采用OligodT或隨機(jī)引物利用逆轉(zhuǎn)錄酶反轉(zhuǎn)錄成cDNA再以cDNA為模板進(jìn)行PCR擴(kuò)增，而獲得目的基因或檢測(cè)基因表達(dá)該技術(shù)主要用于分析基因的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物獲取目的基因。

4、PCR技術(shù)的基本原理類似于DNA的天然復(fù)制過(guò)程，其特異性依賴于與靶序列兩端互補(bǔ)的寡核苷酸引物DNA的半保留復(fù)制是生物進(jìn)化和傳代的重要途徑雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解旋成單鏈，在DNA聚合酶的參與下，根據(jù)堿基互補(bǔ)。

5、你好，你要擴(kuò)增哪里，那里就是你的說(shuō)的目的片段和基因本身沒(méi)有什么具體關(guān)系可以擴(kuò)增基因內(nèi)的一部分序列內(nèi)含子也好外顯子也好內(nèi)含子+外顯子也好，可以擴(kuò)增基因外的間隔序列，完全是根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要來(lái)定的。

pcr技術(shù)模板dna的作用

同學(xué)，從你問(wèn)問(wèn)題的情況我猜想你可能有些基本問(wèn)題很含糊我試著分析一下1首先PCR是體外大量擴(kuò)增目的DNA的技術(shù)你問(wèn)模板DNA是什么，這是不需要問(wèn)的，你想擴(kuò)增的目的基因是什么什么就是模板你用cDNA來(lái)做PCR模板當(dāng)然是。

引物為人工合成的兩段寡核苷酸序列，一個(gè)引物與靶區(qū)域一端的一條DNA模板鏈互補(bǔ)，另一個(gè)引物與靶區(qū)域另一端的另一條DNA模板鏈互補(bǔ)，其功能是作為核苷酸聚合作用的起始點(diǎn)，核酸聚合酶可由其3端開(kāi)始合成新的核酸鏈PCR引物。

PCR即聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)Polymerase chain reaction的縮寫，它是體外酶促合成特異DNA片段的方法這一方法的要點(diǎn)是合成兩個(gè)分別互補(bǔ)于待擴(kuò)增DNA片段兩端的小片段引物，在含有引物待擴(kuò)增DNA模板核苷酸底物和DNA多聚酶的反應(yīng)體系。